产品描述

D-荧光素钾盐 (D-Luciferin，Potassium Salt) 是一种利用荧光素酶报告基因表达，进行生物活体成像检测的底物。具体作用机制如下，在ATP、镁离子和氧气的作用下，荧光素酶以D-荧光素钾盐作为底物，产生强烈的生物发光信号。活体成像实验中将能够表达荧光素酶的细胞或mRNA等表达载体导入到实验动物体内，而后注射D-荧光素钾盐，通过小动物活体光学成像系统来检测发光强度的变化，进而反映荧光素酶的表达水平。

产品优势

纯度高

提高检测灵敏度，减少背景信号

溶解度高

 能满足客户实验剂量需求

稳定性好，信号值强

提高实验结果的质量和可重复性

产品组分

适用范围

用于动植物体内的生物发光成像检测。

储存条件

长期保存：-30 ~ -15℃密封避光保存36个月；

运输条件：≤0℃。

Q1. 活体成像钾盐、钠盐和自由酸的区别？

A1. 钾盐和钠盐相比于自由酸更易溶于水，溶解度大于50 mg/ml；钾盐和钠盐对比，有文献提到钠离子对荧光素酶发光反应稳定性存在影响，在活体成像实验中钾盐使用率较高。

Q2. 活体成像钾盐溶解后的稳定性？

A2. 活体成像钾盐粉末用水溶解后可在-80℃保存一年，建议分装保存，减少反复冻融，敏感实验需要现配现用。

Q3. 用活体成像钾盐进行活体成像与绿色荧光蛋白检测体内发光相比，有什么优势？

A3. 活体成像钾盐利用荧光素酶发光机制，产生的偏红光比绿色荧光蛋白的绿光在体内的穿透性强近100倍。且荧光蛋白需要激发光来产生反射光，老鼠的皮毛，皮肤都会产生非特异性荧光，使得信噪比降低；而荧光素酶的特异性很强，在活体成像时信噪比更高。

Q4. 活体成像钾盐的纯度对实验有成影响吗？

A4. 会有影响。高纯度能提供准确稳定荧光信号，利于成像，99%以上的纯度较好，诺唯赞活体成像钾盐试剂纯度达99.8%。而低纯度钾盐中含杂质更多，会抑制细胞内酶作用，致使荧光信号减弱、效果变差，如成像不清、背景噪音增加等，影响实验结论。

Q5. 动物活体成像--活体成像钾盐使用什么注射方式？

A5. 肌肉注射、腹腔注射和尾静脉注射都可以。腹腔注射扩散较慢，持续发光时间长；尾静脉注射扩散快，但发光持续时间很短。

Q6. 动物活体成像--如何确定不同模型的峰值信号时间?

A6. 在外源注射D-荧光素钾盐后，10 min后强度达到稳定的最高点，在最高点持续约20-30 min后开始衰减，在外源给予D-荧光素钾盐10 min检测最佳。生物发光信号的动力学具有组织依赖性，建议新模型创建一个动力学曲线，摸索最佳检测时间。

Q7. 动物活体成像--信号强度过低，可能有哪些原因？

A7. 可能原因包括试剂注射量不足、荧光素酶表达水平低、动物个体差异导致代谢过快或对试剂吸收不良、仪器检测灵敏度设置过低、成像时间选择不当等。需要综合考虑实验各个环节，排查可能存在的问题。

Q8. 植物活体成像--叶片亮度不均匀

A8.可能是以下原因导致：

1. 机械损伤：在侵染过程中，叶片可能受到机械损伤，导致局部亮度不均匀；

2. 侵染不均匀：客户在进行侵染操作时，溶液分布不均匀，导致叶片不同部位吸收的溶液量不同；

3. 实验设计有误：载体会影响蛋白表达量，实验设计需调整；

4. 试剂浓度不均匀：使用的钾盐浓度不均匀，导致叶片吸收不均匀。建议试剂现配现用，使用超声清洗仪（带水槽）超声至完全溶解。

Q9. 如何排除非特异性荧光干扰？

A9. 可以设置空白对照组，即对未进行处理的植物叶片或动物进行成像，获取背景荧光信号，然后在实验数据处理时，将实验组的荧光信号减去空白对照组的信号，以排除非特异性荧光的干扰。